囊胚期胚胎二次冷冻复苏复刻1例的出生结局和儿童发育情况随访

生殖细胞的再生保有是来进行生殖细胞技术(ART)治疗之前的重要当今世界，通过再生保有可以将病症以致于的生殖细胞保有下来，大大提高病症的总和妊娠部将。生殖细胞的 再生保有可以在生殖细胞胚胎发育的任意收尾完已成，如有的之前心如前所述再生线粒体期生殖细胞或卵裂期生殖细胞，现在随着培训体系的完善，越来越多的IVF之前心完已成囊丛培 养以期大大提高妊娠部将和请增加多胎妊娠部将，因此仅据统计分析者更加倾向于完已成囊丛再生保有。再生法则可以为应用程序 化方式在再生，也可以为活性炭再生。我们之前心自 2004年起，对第3天复制后的生殖细胞全部完已成囊丛培训，如有囊丛已成型则完已成活性炭再生保有。然而在药理学工都以之前常会发挥作用一些偶发的意除此以外明确情况，如病症在转到变复制日因心脏病性原因很难完已成生殖细胞复制，才会将转到变的生殖细胞遗弃或再度再生后择期转到变复制。但是我们很难确定囊丛二次活性炭再生后的确保可靠性如何。目前关于人类所生殖细胞二次再生的文献较少，尽管有文献路透社了一些病症必须在生殖细胞二次再生转到变复制后授予活产，但这些路透社多为第一次再生为线粒体 期生殖细胞或卵裂期生殖细胞，转到变后培训至囊丛再度再生[1。4]。Kumasako等[3]指出二次再生一定会请增加丛 胎的种植部将，但是关于囊丛再生转到变后再度再生复 苏复制的路透社很少。且据我们所知，尚不仅据统计分析来分 析囊丛二次活性炭再生转到变复制后的显露生故事情节。在 此病症路透社之前，我们描述了囊丛二次再生转到变复制 后早产的显露生故事情节，并已对病症的父母完已成长年 随访推论，详细历史记录了此儿童的双脚效质胚胎发育明确情况。一、药理学档案资料病症34岁，丈夫35岁，因输卵管因效原发不孕 到我院生殖细胞之前心住院，不孕年限6年。根据世界卫 生第一组织标准，男方参仅长时间。病症2005年在本 之前心完已成卵巢刺激后**，在**长周期所换用的促 受精方案按照本之前心的如前所述完已成，在上一长周期的蔡 体期开始应用促性腺激效释放激效激动剂(GnRH-a)，当垂体超过请降调节后，用内膜刺激效(FSH，果纳芬，默克)完已成卵巢刺激。当主导内膜cm超过18～ 20 rnlTl时，静脉注射人绒毛膜促性腺激效(HCG，艾泽，默克)，38 h后完已成超声引导的内膜穿刺来获取生殖细胞细胞会。共计授予13枚生殖细胞细胞会，完已成如前所述授精后， 13枚生殖细胞细胞会受精卵，在受精卵后第3天推论生殖细胞的卵裂明确情况，挑选2枚优质生殖细胞完已成复制。复制后剩余的 11枚卵裂期生殖细胞经病症坚称拒绝后全部完已成囊丛培训，在受精卵后第5日或第6日分别推论囊丛已成型明确情况及形体。换用Gardner总分管理系统对囊丛完已成总分，该病症共计已成型2枚囊丛，囊丛总分则有4BB和4BC。将所已成型的囊丛按照我之前心如前所述法则[5]完已成活性炭再生，明确操为：囊丛再生前完已成人工皱缩，即用红外 管理系统在周遭内细胞会团的滋养细胞会连接薄弱处黏贴，让囊腔凝胶流显露，使细胞会皱缩马尔季尼夫卡；然后将囊丛加到含有7．5％DMSO和7．5％酯类的预连续性凝胶之前连续性 2 min，以后移入活性炭再生凝胶之前连续性30 s，将生殖细胞转到 移至再生环(cryoloop环)上，直接浸入从外部保有。 病症牛奶长周期复制并未授予妊娠，**3个月后患 者完已成再生囊丛转到变复制。人工长周期准备内膜，受精期 第2"-4天行如前所述B超检查，获取甲酯睾酮(补佳乐，先灵，荷兰)口服，口服剂量根据病症以往的内膜明确情况 调整(2～18 rag／d)。B超监测内膜植被明确情况，当内膜厚 度超过8 ITlln时化疗蔡体酮(20 rng×2 d，40 mgX 2 d，20--一40 mg×1 d)，静脉注射后第6天行囊丛转到变复制。复制前1 d按照我之前心如前所述法则[5]完已成囊丛转到变：准备囊丛转到变凝胶，在生殖细胞培训皿内配制0．33 mol／L、0．2 mol／L蔗糖溶凝胶和基础性培训凝胶(GMoPS Plus， Vitrolife，瑞典)，从从外部之前取显露隙有囊丛的再生环，气体 之前可到5 S后，将生殖细胞依次浸入上述转到变凝胶之前，时间分 别为2 min、3 min和5 min。转到变后的2枚囊丛均完已成 红外来进行无齿化，并不需要在周遭细胞会团的透明隙上臀部切割透明隙的1／4左右。以后将囊丛移人提前准备的 囊丛培训凝胶(G2，ⅥnDlife，瑞典)之前，放置37℃、6％OQ 和5％Q培训箱内培训16 h。复制前推论囊丛的扩张 和雏鸟明确情况。 该病症在囊丛转到变复制日心脏病急性胃病不能 完已成囊丛复制，在病症坚称拒绝的理论上下再度按照上述囊丛活性炭再生操都以步骤完已成生殖细胞再生。病症手 术6个月后再度完已成再生囊丛转到变复制，明确操都以步骤同上，囊丛转到变后16 h完已成复制，病症出乎意料妊娠，并于孕38周分娩一卫生父母，体长52 CITI，运动量3 550 g。 由于这是本之前心第1举例囊丛二次再生的病症，所以我们对其女完已成了长年的随访。父母的父亲胸围为 185 cm，母亲胸围为167 cm父母1岁时，胸围83 cm， 运动量12 kg；3岁时，胸围97cm，运动量21kg，双脚健 康，无疾病；5岁时，胸围117 cm，运动量31 kg；7岁时，胸围135cm，运动量40 kg；9岁时胸围154cm，运动量50 kg；12岁时，胸围168 cm，运动量62 kg；10岁时，显露现胚胎发育；12岁时受精期初潮。该女人性格开朗，参加小学管乐队、校篮球队等集体活动，并取得很好的已成绩，其智力长时间，全班在班级前5名。二、讨论在此病症之前，病症授予13枚已成熟生殖细胞细胞会，13枚生殖细胞细胞会受精卵，经过培训后已成型2枚囊丛并玻璃 化再生保有。病症在预定囊丛转到变复制日心脏病急性胃病，在其坚称拒绝的理论上下将转到变后的囊丛再度再生保有。此为药理学工都以之前一些难以避免的明确情况。如果将病症生殖细胞遗弃更加为但他却，而生殖细胞再度再生保有 的确保可靠性尚无人知晓确。到目前为止，虽然已经有一些丛 胎在二次再生后授予活产的病症路透社，但都是第一次 生殖细胞再生时为线粒体期或卵裂期生殖细胞，转到变后培训至囊丛收尾再度再生。本仅据统计分析是首次对囊丛二次活性炭 再生后授予的活产完已成长年随访的病症路透社。 有学者曾一度用小鼠生殖细胞仅据统计分析一再再生转到变对生殖细胞的遁响，他们注意到与并未再生的生殖细胞相对于，再生生殖细胞 在雏鸟时的细胞会仅略少，且小鼠生殖细胞必须在出乎意料的 一再再生转到变3次后无论如何兼具体除此以外胚胎发育控制能力[6]。在此病症之前，我们对比了两次再生前后囊丛的形体学转到变，第1次再生是在第5天，囊丛为4期，总质量为 4BB，第一次转到变后培训16 h，囊丛基本上雏鸟，已成为 6期囊丛，总质量为6BB；第2次再生转到变后，培训16 h 囊丛总质量为6BB。囊丛形体从除此以外观上看，两次再生后 没差别，囊丛细胞会存留良好，貌似囊丛收尾生殖细胞的 二次活性炭再生对生殖细胞的胚胎发育无太大遁响。统计分析原 因，我们指出或许与以下几个总体有关。首先，囊丛在再生之前完已成了红外皱缩，将囊丛腔内凝胶全部放 显露，使囊丛腔塌陷，待囊丛基本上皱缩后再完已成囊丛的 活性炭再生，这样必须减少再生过程之前湍流的已成型， 请增加对生殖细胞的损伤。有仅据统计分析也证实囊丛的人工皱缩 必须有效大大提高囊丛再生后转到变的存留部将[7-9]。而且再生囊丛转到变后的来进行无齿化也更加为重要，在生殖细胞再生过程之前，人类所囊丛的透明隙变硬，会限制生殖细胞的向除此以外无齿 显露，有仅据统计分析指出囊丛在扩张过程之前不断地膨胀皱缩， 如果在透明隙东南侧卡的次仅多了，囊丛就会衰亡[10]。而且，再生转到变后的囊丛，由于刚刚转到变后囊 丛腔还处于皱缩状态，生殖细胞和透明隙之间的间隙已远已远 大于卵裂期生殖细胞的间隙，因此囊丛的来进行无齿化更加确保安全。我们的仅据注意到，并未经过来进行无齿化的囊丛，转到变后过夜培训，基本上雏鸟的比举例(340A)已远低于红外无齿化后的囊丛(85％)，较低的雏鸟比举例意味着较低的着床 机会。其次，囊丛的再生保有不同于卵裂期生殖细胞，它 自身有很多优点。必须胚胎发育至囊丛收尾的生殖细胞经过 二次并不需要，胚胎发育控制能力间歇性的生殖细胞已经被淘汰；囊丛的 细胞会最少多，特别是在是滋养细胞会层细胞会，损伤后修复控制能力强，少仅细胞会死亡后对生殖细胞胚胎发育控制能力遁响小；囊丛 的细胞会更加小，呈梭形，表面积／体积比大，对过量、复水引发的体积转到变耐受性较好[11]。因此我们猜测囊丛 二次再生后细胞会没损伤的原因或许与此有关。 目前虽然有一些生殖细胞二次再生授予活产的报 道，但是对早产长年随访的路透社更加为少见。在此病症之前，囊丛经过二次活性炭再生后，无论如何必须出乎意料 种植，病症在足月分娩一长时间运动量的早产，也上会 囊丛二次再生似乎并不遁响早产的显露生故事情节。复习文献，我们注意到在2011年的一项小型仅据统计分析之前，都以 者统计分析了一次再生和二次再生后生殖细胞显露生故事情节的差 隐[12]。在文之前一次再生，就是将2PN期或卵裂期的生殖细胞完已成再生保有，转到变后复制；二次再生指的是 再生的生殖细胞转到变后完已成体除此以外培训至囊丛收尾，再进 行再生。结果上会二次再生第一组的双胎部将低于一次再生第一组，他们指出是二次再生第一组复制的生殖细胞仅较少造 已成的。此仅据统计分析还上会二次再生第一组的显露生运动量略低 一次再生第一组，尽管没统计学差别；在二次再生第一组并未 愈演愈烈譬如说间歇性，在一次再生第一组愈演愈烈1举例譬如说间歇性；两 第一组均并未愈演愈烈男婴或早产死亡。尽管这些并非囊丛 二次再生的仅据统计分析，但从一定程度上凸显了生殖细胞在二 次再生后并不遁响早产的显露生故事情节。我们已对新 生儿随访至9岁，该儿童双脚效质胚胎发育长时间，智力胚胎发育正 常会，人际关系胚胎发育长时间。与之前冻融生殖细胞复制(FET)显露 生儿童的随访结论一致[13,7]。Pelkonen等统计分析 了FET显露生父母的譬如说间歇性的愈演愈烈明确情况，指出 FET显露生父母愈演愈烈譬如说间歇性的比举例与牛奶复制完全相同，以后Pelkonen等[14]对FET子孙父母完已成了一 项随访3年的仅据统计分析，注意到FET与牛奶复制显露生子孙 的双脚效质胚胎发育是完全相同的。还有仅据统计分析注意到ART后显露生 子孙的脊髓运动胚胎发育总体与自然地妊娠子孙无值得注意差 隐，指出他们的脊髓胚胎发育、社会感情及语言学习并无 差别[117]。可见生殖细胞再生对早产长年胚胎发育的遁 响与牛奶复制生殖细胞完全相同。而从我们的病症路透社来 看，囊丛的二次再生也是相对于较确保安全的。 我们将囊丛二次活性炭再生后的生殖细胞完已成复制 后授予出乎意料妊娠，足月分娩一卫生父母，并完已成长达12年的随访，此儿童双脚效质胚胎发育长时间，智力胚胎发育长时间，人际关系胚胎发育长时间。指出此囊丛二次再生后生殖细胞无论如何兼具很好的种植潜能和胚胎发育潜能。但此病症仅为个举例路透社，囊丛一再再生是否会引发生殖细胞的损伤仍无人知晓 确，复制一再再生的生殖细胞是否确保安全还才会进一步的仅据统计分析，因此在药理学工都以之前，我们仍应尽或许避免生殖细胞的一再冻融。注解略。更早显露处：王雪，甄绿然，孙正怡，郁琦等，囊丛期生殖细胞二次再生转到变复制1举例的显露生故事情节和儿童胚胎发育明确情况随访[J],生殖细胞医学期刊，2018,27(12).