程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的的进展

尿素巨噬细胞( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体切除新种”，已在移到性乳腺癌、癌和结直肠癌中都用于病因称赞。小巨噬细胞胃癌(Small celllung cancer，SCLC)组织起来新种来源不足，且缺乏有效的监测开刀移到和预见病因的微生物研究课题。近期研究实质性者CTCs在SCLC中都的流行病学运用于透过了追寻性研究实质性，断定CTCs对SCLC的诊疗、依此，监测开刀、移到，审计、病因以及建立空无外科手术方案等兼具重要含意，本文就CTCs在SCLC流行病学运用于中都的研究实质性进展予以研究报告。

一、SCLC病患CTCs的样品步骤

CTCs的样品步骤主要有流式巨噬细胞样品新技术( fluocytometry，FCM)、限制性一聚合酶链催化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统会、CTC闪存(CTC-chip)新技术和膜滤过分离巨噬细胞新技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中都CellSearch系统会因其半自动化的操纵平台，较高的抗原、敏感度和可重复性，被选为最常运用于的CTCs样品步骤。

晚在2004年，Allard等率先运用于CelISearch法则样品了99由此可知胃癌（没列举SCLC由此可知数）病患的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip法则样品了55由此可知胃癌病患上皮细胞噬C TCs。2009年以后的研究实质性多采用CeIISearch法则样品SCI．C病患上皮细胞噬CTCs，然而该步骤由于对缺乏上皮巨噬细胞基本特征的巨噬细胞会显现出来漏检意味著，且与免疫磁珠及抗原转化的CTCs不会行某些原先的样品，流行病学运用于受到局限于。

近期，随着纳米科技的工业发展，凋亡CTCs表面研究课题的抗原辨别分f剪裁的纳米材料转化微流控新技术的CTCs样品平台的研究实质性受到广为关注，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs纳米样品选为最具创新性和转化潜质的诊疗新步骤，实质性功不可没法则。但就在此之前来看，原先的CTCs样品步骤各有利弊，没有研究实质性确认哪种步骤对SCLC的CTCs样品格外有占优势。着眼期望，全面性开发设计抗原、敏感度格外高的CTCs样品新技术，为SCLC的基础和流行病学研究实质性引发突破。

二、CTCs在SCLC流行病学运用于中都的研究实质性现状

（一）CTCs可用与SCLC的诊疗、依此

近期多项研究实质性显示CTCs可用新技术水平与SCLC的诊疗、依此有密切关系0 2009年Tanaka等运用于CeIISearch法则样品了1 50由此可知7.5ml上皮细胞噬CTCs，其中都胃癌1 25由此可知、非恶性25由此可知，胃癌病患包含116由此可知非小巨噬细胞胃癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9由此可知SCLC。

研究实质性结果显示SCLC病患CTCs阳性率为66.70-/0（6由此可知／9由此可知），轻微少于NSCLC病患的CTCs阳性率(腺癌25.9%，鳞癌40.9%；腺癌对比SCLC，P

同年，Hou等运用于CeIISearch法则样品了50由此可知初治的SCLC病患上皮细胞噬CTCs，包含20由此可知局限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患和30由此可知广为期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患，时间延迟期ED-SCLC及LD-SCLC病患的中都位CTCs可用并列237和2个/7.5ml噬，7由此可知没检出CTCs的病患均为LD-SCLC，证明CTCs可用新技术水平与SCLC依此涉及。

十分相似的推论在2012年被日本研究者Naito等确认，研究实质性者在51由此可知SCLC病患中都立用CeIISearch法则样品时间延迟期CTCs新技术水平，结果显示ED-SCLC,病患的中都位CTCs可用为9.5个f 7.5ml噬，而LD-SCLC仅为1个／7.51111噬，更进一步证明ED-SCLC病患的CTCs新技术水平少于LD-SCLC病患。

（二）CTCs审计SCLC的及病因

CTCs确实可作为审计SCLC和病因的有救就是指f,匙研究实质性者们一直在探讨的难题。Houi等在2009年通过CellSearch法则样品了50由此可知SCLC病患(LD-SCLC20由此可知，ED-SCLC30由此可知)的CTCs，断定CTCs>300个/7.5ml噬的病患及CTCs

时间延迟期CTCs>=50和

在该研究实质性中都SCLC病患的病因并不一定参数实体化8个/7.5ml噬，以此将病患分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样运用于CellSearch法则样品59由此可知SCLC病患在时间延迟期、1长周期治疗后及4长周期治疗结束后外固噬CTCs新技术水平，其中都ED-SCLC病患38由此可知，LD-SCLC病患2 1由此可知c时间延迟期有43由此可知病患(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml噬，CTCs>215个/7.5ml噬和CTCs

经过1长周期治疗后病患CTCs新技术水平极低，且1长周期治疗后CTCs

研究实质性者推断CTCs新技术水平是SCLC病因的独立受到影响表征，其中都1长周期治疗后CTCs新技术水平是SCLC和病因最强的预见表征。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究实质性中都，研究实质性者尝试在155由此可知ED-SCLC中都转为凋亡外科手术，并对其中都123由此可知病患时间延迟期CTCs透过样品，结果显示凋亡外科手术没能延长ED-SCLC病患的PFS和OS，但断定时间延迟期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml噬的mPFS并列4.4和4.3个翌年（P=0.07），OS并列10.7和7.2个翌年(P=0.01)。研究实质性者相信虽然凋亡外科手术没法则能减少ED-SCLC病患的PFS和OS，但却断定了CTCs意味著是SCLC病患的病因研究课题。

最近，Igawa等尝试运用于OBP-401测试样品SCLC病患上皮细胞噬CTCso运用于OBP-401测试样品乳腺癌和胃癌病患CTCs的涉及研究实质性已为晚期报道。研究实质性不属于30由此可知韧治的SCLC病患，29由此可知病患(96%)上皮细胞噬CTCs阳性。在时间延迟期，21由此可知病患CTCs

（三）CTCs监测SCLC的开刀和移到

原先的研究实质性表明通过样品CTCs的显现出来来监测SCLC的开刀和移到兼具重要的流行病学含意o Tanaka等研究实质性断定CTCs新技术水平‘j 125由此可知胃癌病患（包含9由此可知SCLC病患）进展轻微涉及，除此以外是与低处移到密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者相信CTCs可作为监测胃癌低处移到的微生物标记物。Natio等研究实质性断定SCLC在时间延迟期、外科手术结束后及开刀后CTCs的阳性率并列68.6%、26.5%和67.6，提醒SCLC开刀后上皮细胞学CTCs新技术水平消退，发生低处移到脑部的比由此可知为0、1和>=2的病患其中都位CTCs可用并列2.0、7.5和21个/7.5ml噬,提醒CTCs新技术水平与低处移到脑部的比由此可知有关，低处移到越多，CTCs可用越少（p

三、CTCs在SCLC流行病学运用于中都的追寻方向

开刀和移到是引发病患外科手术失败和死亡的主要因素，及时断定的开刀和移到并采敢致力有效的外科手术措施可显著减少病患几率。然而，由于SCLC缺乏需要监测开刀和移到的微生物研究课题，且常规影像学检查不会断定微移到灶及比较大残留肿瘤，引发发生开刀和移到的SCLC病患不必及时接受诊疗和外科手术。

流行病学中都部分LD-SCLC的病患病因区别较大，提醒有些局限于期的病患在诊疗时意味著已发生了影像学不必断定的微移到而被选为潜在的广为期病患。通过样品上皮细胞噬CTCs的显现出来及比由此可知变异从而对SCLC病患游离状态透过动态、动态地监测和称赞，及时断定的开刀、移到，将有助于流行病学眼科医生对外科手术及早的把握和外科手术手段的考虑，但究竟CTCs的比由此可知或变异参数为多少时需要精确总结SCLC的开刀或移到尚能不明确，需要格外多的循证外科证据予以默许。

CTCs在审计SCLC病患外科手术层面的运用于尚能处于追寻阶段，外科手术全过程中都CTCs比由此可知的变异与SCLC病患治疗的涉及性及其与SCLC病患放疗及早的考虑等难题在期望需大量的流行病学研究实质性。近5年，对CTCs确实可作为SCLC病患病因就是指标的研究实质性逐渐增多，但SCLC最佳的病因CTCs并不一定参数尚能无定论，疑虑颇。

其中都3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究实质性将SCLC的病因CTCs畀定参数分别实体化为50、8和2个／7.5ml噬，区别很大，这意味著与研究实质性采用的统计学步骤不尽相同以及入组样本量较少有关。近期意大利研究者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病患单独研究实质性，对时间延迟期、l长周期治疗后CTCs以及外科手术前后CTCs的变异参数分别实体化病因并不一定参数，为期望的研究实质性提供了新的渐进。笔者所在的科研团队也正致力于我国SCLC病患病因最佳CTCs并不一定参数的研究实质性，结果有点期待。

的空无外科手术是外科手术模式的工业发展方向。SCLC病患对治疗用药的催化存在轻微的个体区别，其主要因素意味著与十分复杂的异质性、基因表达区别及抗原有关。所以，逐步明晰SCLC的测序学基本特征对做到无论如何含意上的SCLC空无外科手术尤为重要。近期我国研究者王洁等研究实质性人员通过运用于单巨噬细胞基因化学合成手段对病患单个CTC透过全测序、外显子测序化学合成。

在此项研究实质性中都，谢晓亮教授发明的多重熔融和加成尿素的扩充新技术(MAIBAC)，成功做到了对病患上皮细胞噬单个CTC的全测序扩充和浅层化学合成，在单个巨噬细胞新技术水平探测全测序基因拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单巨噬细胞新技术水平CTCs测序化学合成新技术可及时提供如耐药遗传性等空无外科手术所需的重要信息，同时也为期望SCLC凋亡用药的开发设计提供新技术默许。

SCLC组织起来新种难以获取，限制了原先各项检查和研究实质性的透过，而利用CTCs构建的SCLC尿素巨噬细胞超级任天堂突起( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望克服这一棘手难题。最近，Hodgkinson等尝试将6由此可知ED-SCLC病患lOml上皮细胞噬中都的CTCs提炼后注射到水痘活体静脉，结果在4只活体身上产生了CDXs，证明SCLC病患的CTCs兼具致突起性。

同时运用于CelISearch法则样品这6由此可知SCLC病患的CTCs，结果显示成功产生CDXs的4由此可知病患的CTCs可用均>400个／7.5ml噬，而另外2由此可知没产生CDXs的病患其CTCs可用并列222和20个／7.5ml噬，提醒SCLC的CTCs致突起性与上皮细胞噬CTCs教量有关。更进一步分析断定相较于治疗敏感度SCLC，治疗抗原SCLC病患的CDXs愈来愈多时间略长、生长格外迅速。对3由此可知CDXs给予顺铂和依托泊苷治疗用药，其敏感度排序为CDX3>CDX2>CDX4，其所病患的OS并列9.7.3.5.0.9个翌年，提醒对CDXs透过游离药敏测试可以间接催化病患生存时间。

该研究实质性显示部分SCLC的上皮细胞噬CTCs兼具干巨噬细胞特性，可透过游离培养、产生与原发高度十分相似的CDXs，为SCLC病患的游离药敏测试、耐药机制分析等一系列检查和研究实质性提供了足量的组织起来，克服了SCLC病患新种来源不足的难题。

推论

从现行的研究实质性可以看出，虽然CTCs在SCLC中都的流行病学运用于仍处于追寻阶段，但前景广阔。在此之前，诸多转化性研究实质性即将透过中都，相信随着研究实质性的不断深入，CTCs有望被选为SCLC的轻而易举，期待CTCs在SCLC的领域中都为我们引发惊喜。

撰稿： 雾